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細(xì)胞污染怎么辦?不要慌,教你快速鑒別+處理!

更新時間:2024-12-30      點(diǎn)擊次數(shù):322

細(xì)胞質(zhì)量決定實(shí)驗(yàn)的進(jìn)程與結(jié)果,相信很多小伙伴在細(xì)胞培養(yǎng)上走了不少彎路,事實(shí)上因?yàn)榧?xì)胞污染而耽誤了實(shí)驗(yàn)進(jìn)度,影響畢業(yè)和發(fā)文章的進(jìn)程的事件時常發(fā)生。

  所以今天小編整理了一下細(xì)胞培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的一些現(xiàn)象與處理方法,希望可以幫到大家。

  一、細(xì)菌污染

  細(xì)菌污染最為常見,一旦操作稍有不當(dāng),就會引起細(xì)胞污染,細(xì)菌污染后顯微鏡下觀察呈現(xiàn)有黑色細(xì)條沙狀,當(dāng)然,根據(jù)感染的細(xì)菌不同,所呈現(xiàn)的狀態(tài)也不盡相同,有球形、桿狀等,其次,培養(yǎng)液發(fā)黃,變渾濁,可明顯看見培養(yǎng)皿中有細(xì)沙狀的沉淀物,時不時還有異樣氣味發(fā)出,如下圖所示:

11.jpg

 

  處理方法:
  在培養(yǎng)基中加入抗生素處理,可以用四環(huán)素,慶大霉素,或者鏈霉素,前兩者的工作濃度是50 μg/mL;鏈霉素的工作濃度是100 μg/mL。但是,細(xì)胞本身也有影響,狀態(tài)大不如從前,所以,防范于未然,正確操作、嚴(yán)格執(zhí)行無菌操作規(guī)范,定期清理消毒培養(yǎng)設(shè)施才是關(guān)鍵!
 

  二、真菌污染

  真菌污染培養(yǎng)液清亮透明,不會像細(xì)菌感染大爆發(fā),所以很難早期發(fā)現(xiàn),鏡下有時候象絲狀,有時候象珊瑚狀,慢慢地會長出很細(xì)的黑色絲狀物,這個時候,已經(jīng)晚了,細(xì)胞很難救活了。

12.jpg

 

  處理方法:趕緊扔掉,不要再想挽救,即使再珍貴。然后消毒滅菌培養(yǎng)間,CO2孵箱,器皿和培養(yǎng)液。
 

  三、霉菌污染

  同真菌感染一致,因?yàn)榕囵B(yǎng)液是清亮的,所以霉菌污染早期難以發(fā)現(xiàn),等發(fā)現(xiàn)時往往已經(jīng)為時過晚了。培養(yǎng)液中慢慢地出現(xiàn)絮狀雜質(zhì),鏡下可見呈細(xì)絲狀的團(tuán)狀漂浮物,如同風(fēng)中柳絮,一般不仔細(xì)看發(fā)覺不出來。細(xì)胞仍可生長,但時間一長,細(xì)胞的狀態(tài)就變差,不再增長。見下圖。

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  處理方法:建議果斷舍棄該污染細(xì)胞,將環(huán)境消毒,因?yàn)槊咕念B固可能會導(dǎo)致下幾批細(xì)胞都會污染,所以,采用酒精底地擦洗一遍CO2孵箱。然后再用新潔爾滅擦洗一遍,把水盤里加上飽和量的硫酸銅。千萬不可大意!
 

  四、支原體感染

  培養(yǎng)液變渾濁,支原體感染細(xì)胞以后,細(xì)胞病變不很明顯,只是細(xì)胞狀態(tài)變差、生長變慢,在顯微鏡下觀察可能會有小黑點(diǎn),但培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁。細(xì)胞傳代以后就出現(xiàn)細(xì)胞間黑點(diǎn),細(xì)胞空泡化,很多類似凋亡、壞死的細(xì)胞,最終細(xì)胞漂浮,死亡。

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  處理方法:
  如果不是很珍貴的細(xì)胞的話,建議直接扔了吧。還是那句話,預(yù)防為主,如果是珍貴的細(xì)胞的話,建議使用——支原體清除培養(yǎng)基。

  好物推薦——支原體清除培養(yǎng)基

  此款支原體清除培養(yǎng)基是在市面上已有的支原體清除培養(yǎng)基基礎(chǔ)上開發(fā)的新一代產(chǎn)品,含有清除支原體的特殊成分(一種混合制劑,可通過抑制DNA和支原體生長所必須的相關(guān)蛋白合成來取得良好的支原體清除效果,挽救珍貴的細(xì)胞,減少因支原體污染帶來的損失)。

  此產(chǎn)品經(jīng)過了數(shù)十種細(xì)胞的測試和長期的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,對細(xì)胞無害,對清除支原體污染效果好,能夠很好的抑制和殺滅支原體。并且安全可靠,工作濃度低,無細(xì)胞毒性。

  使用支原體清除培養(yǎng)基處理污染細(xì)胞前后對比圖:

  

TIM截圖20190820152502.png

 


  五、黑膠蟲污染

 

  開始污染時對細(xì)胞無影響,當(dāng)數(shù)量達(dá)到一定程度時就會對細(xì)胞產(chǎn)生影響。400倍顯微鏡下可見點(diǎn)狀或片狀游動小體,培養(yǎng)液也是不渾的,一般不會太影響,細(xì)胞還是可以用的。常常是細(xì)胞生長狀態(tài)良好,且觀測到的運(yùn)動物無明顯增多,且培養(yǎng)液顏色、透明度無明顯變化,對細(xì)胞生長狀態(tài)不會有明顯影響,在細(xì)胞增殖旺盛之后會自然消失,除更換血清外無須特殊處理。

 

15.jpg

  處理方法:可以增加細(xì)胞的種板密度,以提高細(xì)胞的生存率,盡早處理細(xì)胞,越快越好。如果實(shí)在來不及了,推薦使用——黑膠蟲清除培養(yǎng)基

  好物推薦——黑膠蟲清除培養(yǎng)基

   黑膠蟲清除培養(yǎng)基經(jīng)過了上百種細(xì)胞的測試和長期的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,對細(xì)胞無害,對清除“黑膠蟲"污染效果好,能夠很好的殺滅和抑制“黑膠蟲",其它品牌的支原體培養(yǎng)基。

  使用黑膠蟲清除培養(yǎng)基理污染細(xì)胞前后對比圖:

TIM截圖20191213151321.png

 

 

  溫馨提醒:

  學(xué)會對各種污染情況的辨別和處理是一項的實(shí)驗(yàn)技能,希望大家在看完我們的文章后結(jié)合你的實(shí)驗(yàn)操作,學(xué)會如何應(yīng)對細(xì)胞污染。

  研發(fā)了多種支原體清除培養(yǎng)基及黑膠蟲清除培養(yǎng)基可供大家選擇使用,如果您要了解或者選購的話,請點(diǎn)擊查看最上方的產(chǎn)品中心選擇對應(yīng)產(chǎn)品即可,如果您在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中有任何疑問的話,也可以隨時點(diǎn)擊最右方的在線咨詢,專業(yè)的技術(shù)人員將為您提供解答。


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